生物安全柜詳解（特點，分類，操作要求，注意事項等）

 一、介紹：生物安全柜顧名思義就是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實驗材料時，用來保護操作者和實驗室環(huán)境以及實驗材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計的。
二、生物安全等級：
生物安全等級1級（P1）的媒質(zhì)是指普通無害細菌、病毒等微生物；
生物安全等級2級（P2）的媒質(zhì)是指一般性可致病細菌、病毒等微生物；
生物安全等級3級（P3）的媒質(zhì)是指烈性/致命細菌、病毒等微生物，但感染后可治愈；
生物安全等級4級（P4）的媒質(zhì)是指烈性/致命細菌、病毒等微生物，感染后不可治愈。
三、生物安全柜分類：一般是分為三個等級，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級，是根據(jù)結(jié)構(gòu)，氣流速度、氣流類型，排氣方式分的。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)是，世界上生物安全柜領(lǐng)域執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)歐洲標(biāo)準(zhǔn)EN12469和美國衛(wèi)生基金會的第49號標(biāo)準(zhǔn)。
四、生物安全柜的安裝要求：
遠離風(fēng)扇，熱源，空調(diào)出風(fēng)口，實驗室抽風(fēng)機, 實驗室動線及門口避免安全柜受亂流干擾
機臺上方至少須有6 英吋的空間，左右二側(cè)及背后至少須有12 英吋的空間
所有的窗戶都緊閉
安裝地點須為平整及固體式地板
要有專用的電源插座
五、不同級別的生物安全柜作用及特點：
生物安全柜作用：
Ⅰ級生物安全柜是指用于保護操作人員與環(huán)境安全、而不保護樣品安全的通風(fēng)安全柜。適用于對處理樣品安全性無要求且生物危險度等級為1、2、3的媒質(zhì)的操作。
Ⅱ級生物安全柜是指用于保護操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜，柜內(nèi)保持負壓狀態(tài)，適用于生物危險度等級為1、2、3的媒質(zhì)的操作。按照美國NSF49標(biāo)準(zhǔn)，一般將Ⅱ級生物安全柜劃分為A1、A2、B1、B2四個類型。
Ⅲ級生物安全柜為臨床生物防護中應(yīng)用*普遍的一類生物安全柜。臨床中處理高濃度或大容量感染性材料時，級生物安全柜應(yīng)用*多。
生物安全柜特點：
Ⅰ級生物安全柜是一種裝配有HEPA過濾器的防污染裝置。
對操作者及環(huán)境均不受顆粒及感染性生物材料污染。其
工作空間前開口處有定向的向工作空間內(nèi)流動的氣流。
在負壓狀態(tài)下工作。
適合生物污染1，2，3級防護。
空氣的流動為單向、非循環(huán)式，空氣流經(jīng)HEPA過濾器后進入柜內(nèi)，通過工作臺面后又被過濾、經(jīng)排氣口排出；
注意：為了保護操作人員安全和保護環(huán)境，其向內(nèi)的非循環(huán)吸入氣流遠離操作者；安全柜中的氣體在外排到大氣以前先經(jīng)過HEPA過濾器過濾。
Ⅱ級生物安全柜從前開口吸入具有表面速度的氣流，保護操作者，垂直的、無顆粒的層流氣體保護工作區(qū)內(nèi)的樣品不會受到交叉感染。
A1型特點：
維持穿過工作臺開口面的*小平均吸入口風(fēng)速（計算或測量值）為0.38m/s（75ft/min）；
由靜壓箱送出的，經(jīng)HEPA過濾器過濾的垂直氣流是垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分；
允許經(jīng)排出口HEPA過濾器過濾后的氣流返回實驗室；
允許有正壓的污染風(fēng)道和靜壓箱。
A2型特點
維持穿過工作臺開口面的*小平均吸入口風(fēng)速為0.5m/s；
經(jīng)HEPA過濾器過濾后的垂直氣流是由靜壓箱排出的垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分；
經(jīng)HEPA過濾器過濾后，所有廢氣才能排到室外，但廢氣不可再進入安全柜循環(huán)或返回實驗室；
所有被生物污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負壓或者被負壓的風(fēng)道和靜壓箱包圍。
B1型特點：
維持穿過工作臺開口面的*小平均吸入口風(fēng)速（計算或測量值）為0.5m/s（100ft/min）；
經(jīng)HEPA過濾器過濾后的垂直氣流中的絕大部分是由未污染的循環(huán)吸入氣流組成；
經(jīng)HEPA過濾器過濾后的大部分污染的垂直氣流，通過專用風(fēng)道過濾后排入大氣；
所有被生物污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負壓，或被負壓的風(fēng)道和靜壓箱包圍。
B2型特點
維持穿過工作臺開口面的*小平均吸入口風(fēng)速（計算或測量值）為0.5m/s（100ft/min）；
經(jīng)HEPA過濾器過濾后的垂直氣流是由實驗室或室外空氣送入的；
所有的吸入氣流和垂直氣流經(jīng)HEPA過濾器過濾后排入大氣，不再進入安全柜循環(huán)或返回實驗室；
所有污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負壓，或是被直接排風(fēng)的風(fēng)道和靜壓箱包圍。
 Ⅲ級生物安全柜適合于嚴(yán)禁與操作者相接觸的樣品的操作。
全密封，氣密型結(jié)構(gòu)；至少在0.5" 水柱的負壓下工作
出風(fēng)口需經(jīng)過雙HEPA過濾器
適合于生物污染1、2、3、4級防護
工作空間內(nèi)為經(jīng)HEPA過濾器凈化的無渦流的單向流空氣。
進入氣流經(jīng)數(shù)個HEPA過濾器過濾后送入安全柜，排出氣流應(yīng)經(jīng)雙層HEPA過濾器過濾或通過HEPA過濾器過濾和焚燒來處理。
六、生物安全柜操作規(guī)則：
緩慢移動原則：為了避免影響正常的風(fēng)路狀態(tài)，柜內(nèi)操作時手應(yīng)該盡量平緩移動。
物品平行擺放原則：為了避免物品和物品之間的交叉污染現(xiàn)象產(chǎn)生，在柜內(nèi)擺放的物品應(yīng)該盡量呈橫向一字擺開，避免回風(fēng)過程中造成交叉污染。同時避免堵塞背部回風(fēng)隔柵影響正常風(fēng)路。
避免震動原則：柜內(nèi)盡量避免震動儀器（例如離心機、旋渦振蕩器等）的使用，因為震動會使得積留在濾膜上的顆粒物質(zhì)抖落，導(dǎo)致操作室內(nèi)部潔凈度降低，同時如果在前操作面平衡失敗還會引起安全柜對操作者的污染。
不同樣品柜內(nèi)移動原則：柜內(nèi)兩種及以上物品需要移動時，遵循低污染性物品向高污染性物品移動原則，避免污染性高的物品在移動過程中產(chǎn)生對柜體內(nèi)部的大面積污染。
七、生物安全柜操作注意事項：
操作前應(yīng)將本次操作所需的全部物品移入安全柜，避免雙臂頻繁穿過氣幕破壞氣流；并且在移入前用75%酒精擦拭表面消毒，以去除污染。
打開風(fēng)機5～10分鐘，待柜內(nèi)空氣凈化并氣流穩(wěn)定后再進行實驗操作。將雙臂緩緩伸入安全柜內(nèi)，至少靜止1分鐘，使柜內(nèi)氣流穩(wěn)定后再進行操作。
安全柜內(nèi)不放與本次實驗無關(guān)的物品。
柜內(nèi)物品擺放應(yīng)做到清潔區(qū)、半污染區(qū)與污染區(qū)基本分開，操作過程中物品取用方便，且三區(qū)之間無交叉。
物品應(yīng)盡量靠后放置，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動。
操作時應(yīng)按照從清潔區(qū)到污染區(qū)進行，以避免交叉污染。
為防可能濺出的液滴，可在臺面上鋪一用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住安全柜格柵。
柜內(nèi)操作期間，嚴(yán)禁使用酒精燈等明火，以避免產(chǎn)生的熱量產(chǎn)生氣流，干擾柜內(nèi)氣流穩(wěn)定；且明火可能損壞HEPA濾器。
工作時盡量減少背后人員走動以及快速開關(guān)房門，以防止安全柜內(nèi)氣流不穩(wěn)定。
在實驗操作時，不可打開玻璃視窗，應(yīng)保證操作者臉部在工作窗口之上。在柜內(nèi)操作時動作應(yīng)輕柔、舒緩，防止影響柜內(nèi)氣流。
安全柜應(yīng)定期進行清潔消毒，柜內(nèi)臺面污染物可在工作完成且紫外燈消毒后用2%的84消毒液擦拭。柜體外表面則應(yīng)每天用1%的84消毒液擦拭。
柜內(nèi)使用的物品應(yīng)在消毒后再取出，以防止將病原微生物帶出而污染環(huán)境。
安全柜應(yīng)定期進行檢測與保養(yǎng)，以保證其正常工作。工作中一旦發(fā)現(xiàn)安全柜工作異常，應(yīng)立即停止工作，采取相應(yīng)處理措施，并通知相關(guān)人員。